根、幼苗芽叢形成等驟,在實(shí)驗(yàn)室可獲得大量的組培苗。在經(jīng)過基質(zhì)
移栽、練苗、檢查防疫后成為生產(chǎn)用苗。
(
2
)
.
紅豆杉的愈傷組織形成的遲與早的比率,在不同的種
類和同一種類不同植株之間存在差異。同時(shí)與外植體類型、取樣部位
及采集季節(jié)、光照條件、培養(yǎng)基種類等因素有關(guān)。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,
東北紅豆杉、南方紅豆杉、云南紅豆杉均能形成愈傷組織。但形成情
況因紅豆杉的種類及植株的不同也有差異。
研究表明
:
一定程度的水解絡(luò)蛋白
(
CA
)
能促進(jìn)東北紅豆杉、
南方紅豆杉的傷愈組織生長(zhǎng),但濃度大于
0.5%
時(shí)不利于紫杉醇的形
成和積累。
而當(dāng)濃度大于
1%
時(shí)又能促進(jìn)傷愈組織的的愈合,和形成新
的生長(zhǎng)點(diǎn),又不影響紫杉醇的積累。
經(jīng)比較
,
2
、
4D
也有利于傷愈組織的形成
,
也可提高誘導(dǎo)率。
在
2
、
4D
培養(yǎng)基中的愈傷組織顏色新鮮、塊大松軟,對(duì)紅豆杉的愈
傷組織的誘導(dǎo)比較容易。但其它培養(yǎng)基添加物,如細(xì)胞懸浮培養(yǎng)、
B5
培養(yǎng)基、炭源蔗糖也可增加紫杉醇的含量。但高農(nóng)度蔗糖中的葡
萄糖會(huì)抑制紫杉醇的合成。同時(shí)半乳糖對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)顯著。
GIBSON
的研究表明,無論是細(xì)胞懸浮培養(yǎng)還是誘導(dǎo)愈傷組
織細(xì)胞生長(zhǎng)以及紫杉醇含量的形成,在黑暗情況下好于光照條件下。
無論組培的方式用什么品種和部位都要選擇中層增殖能力
旺盛的細(xì)胞組成(表層細(xì)胞含大量的淀粉顆粒、中心細(xì)胞無核,容易
出現(xiàn)分化的管狀分子)
。這樣有利于形成細(xì)胞間的細(xì)胞鏈絲,從而形
成大的細(xì)胞團(tuán),有利于細(xì)胞間小物質(zhì)的信號(hào)傳遞。從而使得紅豆杉的
細(xì)胞以細(xì)胞團(tuán)的形式存在,產(chǎn)生功能性細(xì)胞肌體,促進(jìn)細(xì)胞團(tuán)區(qū)域
化,和細(xì)胞功能分化,這一點(diǎn)是使紅豆杉產(chǎn)生代謝物的前提。
3.
紅豆杉的人工扦插繁殖
紅豆杉的扦插繁育,春季以嫩枝為好,秋季以硬枝為好。一
般扦插時(shí)要做低棚遮蔭處理。一般扦插成活率可達(dá)
70%
以上。而常
規(guī)扦插只有
3%~20%
左右
。
遮陽(yáng)率不低于
60% .
扦插基部要做謹(jǐn)慎的
生根處理。濕度開始時(shí)要間歇式保持在
75~85%
左右。避免通強(qiáng)風(fēng)造
成失水。
影響扦插成活率的因素一般有
:
樹齡
、
溫度
、
藥劑處理濃度、
基質(zhì)、季節(jié)、濕度、品種、和其它人為因素等。資料表明:幾種紅豆
杉的扦插成活率一般較高為:東北紅豆杉
95%
、南方紅豆杉
95%
、
云南紅豆杉
90%
、中國(guó)紅豆杉
86% .
扦插苗在第一年生根過程中,地上部分生長(zhǎng)緩慢,但生根迅
速、側(cè)根發(fā)達(dá)。第二年移栽后,需進(jìn)一步遮陽(yáng)處理、苗床管理。保證
相應(yīng)的環(huán)境條件
,
生長(zhǎng)加快
。
以夏季生長(zhǎng)速度較快
,
冬季和春季緩慢。
此時(shí)應(yīng)注意溫度的變化,長(zhǎng)期的干燥可造成生長(zhǎng)抑制或猝死。但幼苗
在苗床扶壯后,紅豆杉的造林成活率是非常高的。極少死亡,并生長(zhǎng)
迅速。
應(yīng)用扦插的辦法是解決紅豆杉資源短缺,加快紅豆杉藥用林
建設(shè)的較有效的途徑