日本小葉常春藤為常春藤屬中耐寒性較強(qiáng)的品種，植株生長健壯，莖葉濃綠，節(jié)間短粗，組織充實，露地越冬性能良好，在筆者所在的揚(yáng)州地區(qū)已經(jīng)受了－10℃至－15℃的低溫考驗。霜后莖葉略披紅暈，為不可多得的冬綠型垂直綠化材料，具有很好的推廣應(yīng)用前景。采用莖節(jié)、葉片為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)無性系快繁，可有效解決生產(chǎn)應(yīng)用過程中種源稀少、繁殖速率低的矛盾。

材料與方法

采用多年生日本小葉常春藤一年生莖枝的莖節(jié)和葉片為外植體。莖節(jié)外植體初代培養(yǎng)，材料截成厚0．5厘米的小段，葉片外植體切為0 .4×0.5厘米的方塊。培養(yǎng)溫度25℃，光照強(qiáng)度2000lx，光照時間每天12小時。

技術(shù)及應(yīng)用

莖節(jié)外植體帶菌度較高，但組織發(fā)育充實，故以中等強(qiáng)度滅菌劑處理為好，即70％酒精0.5分鐘＋0.1％升汞10分鐘，污染率為29.2％。若將0.1％升汞處理時間增加至15分鐘，雖污染率下降至12.5％，但殺傷率將上升，總體存活率反而會下降，故不宜采用。莖尖外植體因其組織幼嫩，試驗中雖使用較低強(qiáng)度5％的次氯酸鈉處理15分鐘，褐變死亡率仍高達(dá)72.9％；再降低滅菌強(qiáng)度，雖死亡率可以下降，但污染率又上升，在實際操作中較難掌握，故外植體的選用以莖節(jié)為宜。

初代培養(yǎng)效應(yīng)與取材時期密切相關(guān)。4月初正值露地栽培植株萌芽期，接種后外植體萌發(fā)率較高，達(dá)82.4％；5月上旬取用的為當(dāng)年萌生新梢，材料帶菌度低，故接種后污染率較低，為20.1％；7月底進(jìn)入高溫多濕的梅雨季節(jié)，外植體帶菌度急劇上升，滅菌困難，材料污染率上升，高達(dá)89.4％。故日本小葉常春藤的莖節(jié)組織培養(yǎng)，外植體取用時間以4月初到5月上旬為宜。

組織培養(yǎng)中，生長素和細(xì)胞激動素的添加，均以低濃度為宜。初代培養(yǎng)基以6－BA1.0毫克／升－1＋2.4－D0.1毫克／升－1為好，誘芽率可達(dá)90.5％，顯著高于其他處理。誘芽生長量達(dá)1.2厘米，呈極顯著變異水平。繼代增殖培養(yǎng)，在6－BA1毫克／升－1水平，生長素配比量仍以低水平為宜，生長素類別以NAA優(yōu)于2.4－D，試驗范圍內(nèi)以MS＋ 6－BA1.0毫克／升－1＋NAA0.01毫克／升－1的增殖系數(shù)為高。

葉片愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，接種3天葉片卷曲增厚。這不僅和6－BA ／NAA相對比值有關(guān)（1∶3＞1∶2＞1∶1），且和其絕對用量水平緊密相關(guān)，綜合試驗結(jié)果以MS＋6－BA1.0毫克／升－1＋NAA3.0毫克／升－ 1時較高，達(dá)82.4％。

莖節(jié)培養(yǎng)過程中，經(jīng)多次繼代繁殖，發(fā)現(xiàn)有皺葉性狀變異的個體出現(xiàn)。同樣的性狀變異，在其他常春藤物種中有選育成新品種的應(yīng)用范例，若能將變異性狀加以分離、固定，并擴(kuò)大繁殖，在提高其觀賞特性上具良好的應(yīng)用前景，不失為一條途徑。若能將組織培養(yǎng)技術(shù)和輻照誘變等育種手段相結(jié)合，則對常春藤育種研究有很大幫助。



（記者 不詳）