用組織培養(yǎng)法繁殖葡萄,可達(dá)到優(yōu)良葡萄快速育苗的目的,以滿(mǎn)足生產(chǎn)需要。同時(shí)也是工廠(chǎng)化育苗和脫毒苗木快速繁殖的重要手段,并能常年進(jìn)行,縮短了苗木繁殖周期,加快新品種的推廣應(yīng)用。
一、試管苗的初代培養(yǎng)
葡萄組織培養(yǎng)初代培養(yǎng),其繁殖材料多取自大田,常帶有大量細(xì)菌和霉菌,必須進(jìn)行消毒方可獲得無(wú)菌材料。材料采集在前三天無(wú)雨的晴天上午進(jìn)行,取帶腋芽的葡萄半木質(zhì)嫩莖,剪取后立即拿入室內(nèi),先用自來(lái)水反復(fù)沖洗,除去病蟲(chóng)枝、殘傷枝,減除大葉片,裝入廣口瓶進(jìn)行消毒。用無(wú)菌操作技術(shù),倒入無(wú)菌水浸泡和沖洗,倒去無(wú)菌水,加入0.1%升汞(內(nèi)加2%的95%酒精)浸沒(méi)材料,并劇烈搖動(dòng)6分鐘~9分鐘,剪去受傷端面,剪成單芽莖段,接入培養(yǎng)基中。每瓶插一段,正插入內(nèi)。標(biāo)號(hào)后放到培養(yǎng)室培養(yǎng),一周后檢查,如未污染,基本上不會(huì)再污染。通過(guò)對(duì)美人指、早紅提等品種的生產(chǎn),取得了90%以上無(wú)污染成苗率。
二、試管苗的繼代繁殖
對(duì)初代培養(yǎng)合格或引進(jìn)的試管苗,一般采用MS、B5、GS等培養(yǎng)基,具體做法如下:
1.穿好工作服,戴上工作帽,用潔凈的水洗手,再用75%的酒精棉球擦手消毒。
2.取無(wú)菌原種苗瓶放于超凈臺(tái),用75%酒精棉球仔細(xì)擦試包頭紙及苗瓶外體,并解開(kāi)包頭紙捆扎線(xiàn)繩。
3.將彎剪刀、槍狀鑷子浸入75%酒精中,用時(shí)取出在火焰上燒15秒~30秒,涼冷備用。
4.將無(wú)菌原種苗瓶的包頭紙連同棉塞一同拔下,放在超凈臺(tái)一旁,瓶口在火焰上燒5秒~10秒,用冷卻的剪刀將瓶?jī)?nèi)小苗剪成單芽莖段,下端稍長(zhǎng),上端較短,但剪口距芽至少0.5厘米以上。母株基部要留一芽,使其再發(fā)。剪下的單芽莖段,用無(wú)菌鑷子逐個(gè)夾出,放入新的培養(yǎng)基瓶?jī)?nèi),并使葉子和芽露出培養(yǎng)基上方。150毫升三角瓶插5個(gè)左右莖段,插完后將瓶口在火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)燒一遍,旋好棉塞和包上包頭紙,用繩扎好,注明名稱(chēng)和時(shí)間等。如此反復(fù)的接好所有苗子,并放到培養(yǎng)室。一般每月轉(zhuǎn)接增殖3次。
三、試管苗的培養(yǎng)
將接種后的培養(yǎng)苗瓶,放在培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上,培養(yǎng)室晝夜溫度保持在22℃~28℃,新轉(zhuǎn)接的苗瓶應(yīng)放在培養(yǎng)架上層,上層溫度略高易于生根。培養(yǎng)室的濕度以70%為宜,光照2000~3000勒克斯的日光燈。
四、移栽
時(shí)期多在冬季或春季進(jìn)行。
1.光培煉苗。培養(yǎng)室培養(yǎng)的試管苗生長(zhǎng)達(dá)瓶口,有3枚~4枚正常葉片時(shí),根系生長(zhǎng)良好,連同培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)入溫室或大棚內(nèi),逐步去掉瓶塞,放在干凈的溫室中,在2萬(wàn)~4萬(wàn)勒克斯的自然光下煉苗5天~7天,當(dāng)瓶口長(zhǎng)出油亮的葉片,幼莖變淡紅色時(shí)即可出瓶。
2.沙培煉苗。較好備有下鋪電熱線(xiàn)并能調(diào)節(jié)溫度的沙床,使床溫維持在25℃左右。以0.6厘米間距布置電熱線(xiàn),其上鋪墊2厘米的土,壓平,再鋪8厘米~10厘米的干凈細(xì)河沙,濕度以12%左右,即手捏成團(tuán)落地能散。
清晨或傍晚,將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的幼苗輕輕倒出,洗掉根上附著的培養(yǎng)基,栽入沙床,3厘米~4厘米株距,8厘米~10厘米行距,每平方米大約栽400苗~500苗。栽入沙床后,蓋好小拱棚,較初3天,棚內(nèi)溫度保持在25℃左右,較高不超過(guò)30℃,較低不低于20℃。相對(duì)濕度保持在80%~95%;光照0.7萬(wàn)~1萬(wàn)勒克斯。6天~7天后,拆除臨時(shí)小拱棚。
3.溫室營(yíng)養(yǎng)袋煉苗。經(jīng)沙培后的合格苗,小心挖出,在空氣濕度不低于70%,溫度20℃~25℃,無(wú)直射光下,栽入肥土:沙:腐熟有機(jī)肥為1:1:0.2的營(yíng)養(yǎng)缽中,較初幾天對(duì)溫、光、濕的管理同沙培苗相同。
4.大田苗圃移栽。選土質(zhì)疏松肥沃,排灌水方便,距溫室較近且日照良好的地塊作苗圃,將營(yíng)養(yǎng)袋苗移栽即可。小苗有3個(gè)月的生長(zhǎng)期,并及時(shí)打掉副梢,促進(jìn)枝芽老化成熟,達(dá)到合格優(yōu)質(zhì)苗。
(743000甘肅省定西地區(qū)園藝站)
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