非洲菊(Gerberajamesonii),為菊科,扶郎花屬多年生常綠草本植物,又稱“扶郎花”,為世界著名切花。原產于南非,性喜溫暖,適于溫室栽培。環(huán)境條件適宜可終年開花[1]。傳統(tǒng)以種子、分株和扦插繁殖,繁殖速度慢,無法為商業(yè)化生產提供大批量優(yōu)質種苗。利用組織培養(yǎng)方法,可獲得大量品質一致的植株,且其生產不受季節(jié)影響,可周年供應。

1　材料與方法

　　從非洲菊黑心品種中,選健壯開花植株,取未展開的、直徑約1cm大小的花蕾,帶花梗切下。用紗布蘸洗滌劑水溶液擦洗后,在流水下沖洗干凈。在超凈臺上用75%酒精浸泡15s,取出,放入0.1%升汞溶液中消毒8～10min,再用無菌水沖洗5～7次,無菌濾紙吸干表面水份,剝去苞片和舌狀花瓣,留下花托,切成4塊,以MS為基本培養(yǎng)基,附加如下不同激素(濃度單位為mg/L):誘導培養(yǎng)基為MS+BA5～8+IAA0.1～0.5。增殖培養(yǎng)基1BA1+NAA0.5; 2BA1+NAA0.3; 3BA1+NAA0.1; 4BA0.8+NAA0.1; 5BA0.5+NAA0.1。生根培養(yǎng)基11/2MS+IBA0.1+NAA0.05; 21/2MS+IBA0.3+NAA0.05; 31/2MS+IBA0.5+NAA0.05; 41/2MS+IBA1.0+NAA0.05。瓊脂含量為0.7%,糖濃度3%,生根培養(yǎng)基糖濃度減半。培養(yǎng)溫度25±2℃,每天光照12～14h,光照度1500～2000lux。

2　結果與分析

2.1　愈傷組織的誘導

　　在誘導培養(yǎng)基上,接種一周后花托開始膨大,未拔干凈的小花體積增大、伸長,繼續(xù)培養(yǎng),有愈傷組織產生。一個月后,愈傷組織生長并分化出小芽,進而形成叢芽。將未分化的愈傷組織切成小塊,分別移到新鮮的培養(yǎng)基上,每30d轉瓶1次。部分愈傷組織能繼續(xù)生長并獲得小芽,其余的則只見愈傷組織增殖或變褐死亡,繼代幾次后,愈傷組織有玻璃化現(xiàn)象產生。

2.2　芽的增殖

　　及時將帶有芽的愈傷組織轉瓶。切去愈傷組織,以單芽繁殖,增殖周期為25～30d。在5種增殖培養(yǎng)基中均能形成叢生芽,同時,芽基部形成少量愈傷組織。增殖結果:按處理號順序,5種培養(yǎng)基平均每個芽的增殖芽數(shù)分別為9.5、9.9、13.5、10.9、10.1個。增殖培養(yǎng)基以MS+BA1.0+NAA0.1組合較好。說明當細胞分裂素(BA)/生長素(NAA)的比值大時,促進芽的增殖[2],連續(xù)繼代,結果相同。

2.3　芽的生根

　　把高2～3cm的芽單芽切下,接種在生根培養(yǎng)基中,結果4種培養(yǎng)基的生根率都為100%(表1),同時芽繼續(xù)生長、葉面積增大,平均苗高可達5cm以上。10～15d可搬出煉苗、移栽。

　　將煉苗后的瓶苗進行清洗。把生根好的小苗從瓶中取出,輕輕洗凈根部的培養(yǎng)基,注意不要傷根。用800倍甲基托布津(或多菌靈)浸泡10min后撈出,以1∶1的泥炭土和珍珠巖為介質(介質要先灑水,保持一定水份)進行假植,較好次澆好透水,加蓋薄膜保濕,遮陽網(wǎng)遮蔭,注意通風,1周后開始噴殺菌劑,每隔3d噴1次。10d后,新根發(fā)出可去蓋膜,適當增加光照,進行噴霧保濕,以基質不積水為準。15d后,可結合噴藥每周施葉面肥1次。苗的成活率可達95%以上。

3　討論

　　在試驗中,用白砂糖替代蔗糖,苗的生長勢仍很強,苗質不受影響,這在大批量生產中可大大降低成本。試驗過程中,固定NAA0.1mg/L,用BA2mg/L(含BA2mg/L)以上的濃度進行增殖試驗,發(fā)現(xiàn)組培苗的增殖系數(shù)呈下降趨勢,且出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象,BA濃度愈高,增殖系數(shù)愈小,玻璃化愈嚴重。可見,超過一定量濃度的BA對苗的生長起抑制作用。從生根試驗中可看出,在試驗激素濃度范圍內,都能達到較好的生根結果�？梢�,非洲菊組培苗的生根較容易,對激素濃度適宜范圍較寬。通過本試驗,篩選出非洲菊花托組織培養(yǎng)各階段較適培養(yǎng)基,可

工廠化生產非洲菊種苗提供參考依據(jù)。