制備
家庭組培因受到條件的限制,不可能配置大量的配養(yǎng)基,一般每次配置1升為宜。煮制后用PH試紙測定后,分裝成35-40瓶,塞好棉塞,包好包頭紙。(棉塞一定要用作棉衣的棉花卷制,不能使用脫脂棉,然后用紗布包緊,用棉線扎好。棉塞的松緊以手提棉塞瓶子不滑落為宜。)然后放入高壓鍋里高壓滅菌,待高壓鍋噴嘴噴出蒸汽時,扣上壓力閥,從壓力閥噴氣時起計時,連續(xù)維持15—20分鐘后關(guān)火,壓力消失后,打開鍋蓋,取出配養(yǎng)基,放入接種箱內(nèi)待用。初次實驗時,滅菌后的培養(yǎng)基應放置三五天后,觀察無霉菌生長時才能使用。如有霉菌長出,這說明滅菌時間不夠,需要適當增加滅菌時間。
接種
將滅菌后的配養(yǎng)基、無菌水、消毒藥水及使用的器材放入接種箱內(nèi),因接種箱內(nèi)的體積相對較小,所以所用的一切物品都要有序地擺放在相應的位置上,不能隨意擺放,箱內(nèi)濕度較大,點酒精燈一定要是用打火機,不要使用火柴。要特別注意準備好裝污水、污物的容器,盡可能地大一些,因為操作時是不容許開箱取物的。把所有的物品放置好以后,將一裝有10—20ml福爾馬林的磁杯放入箱內(nèi)(較好不要使用玻璃杯,因反應時溫度較高,容易炸裂。),倒入2—5g高錳酸鉀(PP粉),使其蒸氣充滿箱內(nèi),達到滅菌的效果。這時要將接種箱的通氣孔和操作孔封閉好,避免甲醛蒸氣很快散盡。待箱內(nèi)蒸氣散盡后,才能開始接種工作,這段時間大約需要5—10個小時。
接種時,揭去密封在接種箱通氣孔和操作孔上的密封物,取出熏蒸用的磁杯,將接種用的材料送入接種箱內(nèi),開啟紫外線燈,十五分鐘后關(guān)閉紫外線燈,開啟照明燈,即可開始工作。操作時一定要樹立無菌觀念,要把一切物品都看成是帶菌的,要時時都注意防范。工作是由于箱內(nèi)溫度較高,濕度較大,手容易出汗,所以每接種一瓶后都要用酒精擦拭手指,也可以戴指套。另外,操作時要注意防火,由于空間較小,一不小心就容易燒傷手指或引起酒精起火。打開瓶塞時,要將瓶口置于酒精燈上方,用右手的無名指和小指夾住棉塞尾,輕輕將棉塞拔出,棉塞不能置于箱內(nèi)物品上,應用手指夾住,接種后,將瓶口在酒精燈上燒灼一下,棉塞也燒灼一下,,然后在酒精燈火焰上方輕輕塞好,扎好包頭紙,用鉛筆標明品種、接種日期、編號等,然后重復下一瓶。
其實,用接種箱接種與超凈工作臺相比較,工作時人要感覺舒適得多。污染率也是很低的,操作熟練后幾乎沒有什么污染發(fā)生。接種后愈傷組織分化、小苗分化、生長狀態(tài)與在超凈臺上接種的沒有什么兩樣。
培養(yǎng)
在家庭的業(yè)余條件下培養(yǎng)培養(yǎng)的條件不可能得到�?兀砸浞值睦米匀粭l件,接種后的培養(yǎng)瓶可以放在有較強散射光的地方,如靠窗的書柜、寫字臺上,但要避免日光直射,一般室溫在22—28攝氏度時都能正常生長,不是特殊的品種不需要特殊的護理。如室溫太低,可以用紙板、木條、塑料薄膜做一個簡單的培養(yǎng)箱,里面裝一兩個15—25瓦的白織燈,既可以補助光照也可以提高培養(yǎng)的溫度。夏天溫度過高時,有條件的可以擺放在空調(diào)室內(nèi),,沒有空調(diào)室的,降溫雖然困難一些,但大多數(shù)試管苗是可以耐受的,不至于死去。小苗長出后,擺放在書柜或工作臺上,感到自己培養(yǎng)出來的生機勃勃的小生靈,無疑是一種享受。
栽培
當小苗長到一定的時候,就可以配置一些生根配養(yǎng)基將小苗轉(zhuǎn)移培養(yǎng)生根,待長出一定根系時,就可以出瓶種植了。小苗出瓶種植的時候一定要注意以下幾個方面,一是要適當降低溫度;二是要增大濕度;三是要嚴格控制雜菌危害;四是要保證種植介質(zhì)的疏松透氣;五是要保證適當?shù)墓庹�。我通常是用跖石、木屑、稻谷殼混合作基質(zhì),把小苗種植后用百菌清噴霧澆根,蓋上塑料薄膜,少量的小苗干脆用玻璃杯蓋住,大約15天后就能揭去覆蓋物,便可進行正常管理了。
家庭開展組培其實也并不是一件什么很困難的事情,只要多開動腦筋,多想一些辦法,做起來也是很容易地。萬事開頭難,辦法總比困難多。不要自己把自己的能量看得太低,也不要迷信權(quán)威、只要自己有信心,嚴格地按照科學的規(guī)律去做,沒有什么做不了的,沒有什么辦不到的。
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