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圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法

發(fā)布日期:2011-08-19

圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法,其選取當年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當年生莖段為外殖體,經(jīng)過誘導培養(yǎng),20~25天即可以萌發(fā)出生長健壯的新芽;再經(jīng)過20~30天左右的擴增培養(yǎng),15~20天左右誘導生根培養(yǎng)后即可成苗、移栽,移栽成活率可達90%以上;成活后的長勢良好、株形健壯挺拔,擴繁系數(shù)高。
圓齒野鴉椿莖段的組織培養(yǎng)方法特征是:
   �。保┤〔姆椒ǎ哼x取當年萌發(fā)飽滿新芽、或帶芽飽滿的當年生莖段,在距離帶芽節(jié)點1-2厘米處剪取,去除多余的葉片和2/3葉柄;用洗衣粉漂洗干凈后,用自來水滴沖3-5小時;
    2)培養(yǎng)基:
    培養(yǎng)基的配制:基本培養(yǎng)基為MS,Ag,Su,pH值為5.8,生長激素為BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu,附加物為Ac等;培養(yǎng)基的厚度一般為1cm左右;
    誘導培養(yǎng)基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2~2.5g/L)
    誘導培養(yǎng)基→MS+Zu(2~5mg/L)+IAA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(39g/L)+Ag(0.7g/L)
    生根培養(yǎng)基→1/2MS+IBA(0.5mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)
   �。常┎牧舷咎幚恚合葘Σ牧线M行適當?shù)男藜簦孟匆路矍逑床牧�,再將材料放入干凈的燒杯中用自來水沖洗30分鐘,把水瀝干置超凈工作臺備用,用75%的酒精蓋過材料,搖蕩,3-5秒鐘后去除酒精,加入0.1%升汞(HgCl↓〔2〕)處理12分鐘,將汞液倒入廢汞瓶,用無菌水沖洗材料2-3次后,倒去無菌水即可進行接種;
   �。矗┱T導培養(yǎng):取生長健壯的新芽切割成約0.5~1.5cm的莖段,削除新芽、表皮以及殘留的芽外殼,保留2/3新芽幼嫩葉柄以保護腋芽,分別接種在誘導培養(yǎng)基中;
   �。担┡囵B(yǎng)條件:光照時間:12~16h/d光照強度:1500-20001x溫度:24℃±1℃   �。叮┰鲋撑囵B(yǎng):將上述誘導培養(yǎng)、生長健壯的叢生芽切割開,分別接種在增殖培養(yǎng)基中; 
  �。罚┱T導生根:將繼代誘導培養(yǎng)出來的幼苗切取單株,帶有2-3片葉子,株高1-2cm,轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中;
   �。福┬∶缫圃裕寒斣嚬苊玳L至3~4cm高,葉子有5~7片,根有3~5條,長度約2~3cm時,就可進行移栽;先把要移栽的苗搬移到培養(yǎng)室外,煉苗3~5天,以增強試管苗對室外環(huán)境的適應(yīng)能力;然后打開瓶蓋鍛煉2~3天,再從培養(yǎng)瓶中取出,洗去根部培養(yǎng)基,移入蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基質(zhì)中,小苗移栽后放入室溫中,保濕遮陰。

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