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  • 組培中污染產(chǎn)生的原因及防治措施發(fā)布時(shí)間:2010-05-11

      隨著生物技術(shù)的發(fā)展,組培生產(chǎn)技術(shù)在我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用速度很快,我國(guó)組培工業(yè)化生產(chǎn)始于20世紀(jì)70年代,近年來(lái)這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用范圍十分廣泛,尤其在作物育種、苗木及花卉的脫毒和快繁等方面更具其他技術(shù)手段所無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。雖然組織培養(yǎng)技術(shù)操作并不難,但對(duì)一些技術(shù)環(huán)節(jié)的要求卻十分嚴(yán)格,稍有疏忽便會(huì)延誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,甚至導(dǎo)致整個(gè)試驗(yàn)失敗,為此我們必須重視在組織培養(yǎng)生產(chǎn)過(guò)程中污染帶來(lái)的危害。以下就組織培養(yǎng)過(guò)程中的污染來(lái)源及防止作一些探討。   一、在組織培養(yǎng)生產(chǎn)過(guò)程中污染的來(lái)源  �。ㄒ唬┩庵搀w自身帶菌   許多植物都是栽培在室外,而空氣環(huán)境中有大量微生物存在,這些微生物可通過(guò)植物自然的孔口或傷口進(jìn)入植物內(nèi)部,也有一些兼性腐生菌,可由外植體或通過(guò)相應(yīng)的侵入機(jī)制侵入植株內(nèi)部,如果在接種操作前對(duì)這些認(rèn)識(shí)不足,對(duì)外植體消毒不嚴(yán),就很容易發(fā)生污染現(xiàn)象。   (二)培養(yǎng)基或接種工具滅菌不徹底   在對(duì)培養(yǎng)基滅菌過(guò)程中,如果滅菌時(shí)間過(guò)短、滅菌時(shí)溫度達(dá)不到要求、滅菌鍋壓力記數(shù)不準(zhǔn)等因素都有可能導(dǎo)致培養(yǎng)基滅菌不徹底,使一些病原微生物殘留在培養(yǎng)基中,一旦接種后就會(huì)造成污染。使用滅菌不徹底的接種工具,滅過(guò)菌的接種工具存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng),都會(huì)導(dǎo)致在生產(chǎn)中造成污染,所以生產(chǎn)中要做好培養(yǎng)基和接種工具的滅菌和消毒工作。  �。ㄈ┙臃N室消毒不嚴(yán)   在組培生產(chǎn)過(guò)程中,除了植物本身外,大部分污染來(lái)源便是來(lái)自接種操作室。因?yàn)樵诮臃N操作室中,未過(guò)濾的空氣中含有大量的微生物,這些微生物可隨著操作人員或植株接觸時(shí)而發(fā)生污染,所以接種室消毒不嚴(yán),也易引發(fā)污染發(fā)生。   (四)人員因素   在整個(gè)操作室內(nèi),人員是較大的帶菌者,其不管在毛發(fā)或是衣服等,都隱藏著數(shù)不清的微生物。這些微生物的存在都可能造成一定的危害。為此在進(jìn)入操作室前,接種人員的工作服、鞋帽都必須進(jìn)行消毒處理,進(jìn)入接種室必須換上消毒過(guò)的鞋帽,接種前,接種人員必須認(rèn)真洗手,還要用70%的乙醇棉球擦拭雙手,這樣在一定程度上可減輕污染的危害。  �。ㄎ澹┏瑑艄ぷ髋_(tái)上的濾網(wǎng)過(guò)濾不徹底   超凈工作臺(tái)使用過(guò)久,或保養(yǎng)不當(dāng),而造成濾網(wǎng)壞掉或灰塵過(guò)多,導(dǎo)致在接種操作時(shí)對(duì)空氣過(guò)濾不徹底,也易產(chǎn)生污染。 (六)栽培過(guò)程污染   在栽培室,組培瓶外和外界氣體交換時(shí),亦會(huì)有一些微生物進(jìn)入。污染幾率取決于空氣中帶菌密度與組培瓶空氣交換率。   二、防止污染的方法  �。ㄒ唬┱J(rèn)真做好外植體的選擇和消毒工作,防止外植體帶菌   對(duì)外植體的選擇要考慮選擇的時(shí)間和部位,盡量選取帶菌少的材料,在時(shí)間上一般在植株的生長(zhǎng)旺盛季節(jié)如春季和秋季病原微生物數(shù)量相對(duì)要少些,對(duì)于外植體的部位一般以幼嫩的部位較好。另外要做好外植體的消毒工作,目前外植體消毒常用藥劑有:70%~75%的乙醇溶液,0.3%~0.6%的次氯酸鈉溶液和0.1%的升汞溶液,選用何種消毒劑和消毒時(shí)間要根據(jù)外植體的幼嫩程度和部位確定,一般要求既將外植體表面的微生物殺死,又要求盡可能少傷害外植體組織和表層細(xì)胞。在生產(chǎn)實(shí)踐中防止外植體污染,也可實(shí)行多次滅菌和交替滅菌相結(jié)合的辦法,較終達(dá)到消滅雜菌的目的。   (二)改善接種室和培養(yǎng)室的環(huán)境條件,保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔無(wú)菌   與外植體自身帶菌所產(chǎn)生的污染相比,操作污染和環(huán)境污染是可以克服的。在組培生產(chǎn)中,真菌的污染一般與環(huán)境有關(guān),細(xì)菌污染與接種材料及工具有關(guān)。生產(chǎn)中要通過(guò)定期做好對(duì)接種室與培養(yǎng)室消毒工作,減少環(huán)境中的微生物數(shù)量,減輕對(duì)污染的危害,為此,在接種前接種室要認(rèn)真做好消毒工作,且超凈工作臺(tái)在接種前,認(rèn)真擦洗,紫外燈要開(kāi)20~30min左右。培養(yǎng)室的相對(duì)濕度應(yīng)控制在70%左右,對(duì)每件物品放到超凈工作臺(tái)上,都要用75%酒精認(rèn)真擦洗一遍,方可放到臺(tái)面上,只有這樣在一定程度上可控制污染程度。  �。ㄈ┎僮魅藛T嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程   接種人員在接種操作中,應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范要求。接種人員的工作服、口罩、帽子等布質(zhì)品要定期進(jìn)行濕熱滅菌,在超凈工作臺(tái)的操作區(qū)內(nèi),不要放入過(guò)多的待用物品,避免氣流被擋住產(chǎn)生污染。定期清洗或更換超凈工作臺(tái)過(guò)濾器,接種前15~20min打開(kāi)風(fēng)機(jī),風(fēng)速調(diào)整到20~30m/min,并對(duì)臺(tái)面用75%酒精噴霧消毒,工作人員進(jìn)入操作室前必須對(duì)工作服、鞋帽進(jìn)行消毒處理,進(jìn)入接種室必須換上消毒過(guò)的鞋帽,接種前,接種人員必須認(rèn)真洗手,還要用70%的乙醇棉球擦拭雙手,只有接種過(guò)程中嚴(yán)格遵守操作要規(guī)范,才可避免因人為因素造成污染。  �。ㄋ模┡囵B(yǎng)基及接種工器具要嚴(yán)格滅菌,確保滅菌質(zhì)量   在對(duì)培養(yǎng)基和接種工具滅菌時(shí),要先檢查滅菌鍋的使用情況,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題要立即檢修。在滅菌過(guò)程中要絕對(duì)保證滅菌應(yīng)達(dá)到的壓力、時(shí)間,確保滅菌質(zhì)量。一般要求壓力應(yīng)達(dá)到0.1個(gè)大氣壓,時(shí)間維持在15~20分鐘,并且壓力表降到零后不能馬上出鍋,防止外界環(huán)境的冷空氣倒吸入已滅菌的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)引起真菌污染,應(yīng)待鍋內(nèi)稍冷卻后再出鍋。對(duì)組培生產(chǎn)過(guò)程中培養(yǎng)容器封口采用塑料蓋、膠塞、棉塞、薄膜等材料,在使用前要認(rèn)真做好清冼和消毒工作,不符合要求堅(jiān)決不用。在分裝培養(yǎng)基時(shí),勿觸瓶口,防止培養(yǎng)基粘在瓶口上,引起污染,瓶口封好后要檢查封口是否破損,扎瓶口位置適當(dāng),松緊適宜。對(duì)已污染組培瓶要經(jīng)高壓滅菌后再清洗。  �。ㄎ澹┰谂囵B(yǎng)基中加入適量的抗生素   這是目前較常用的方法,抗生素可以直接加入到培養(yǎng)基中,也可以用抗生素噴灑或浸泡外植體。但植物種類不同,所用抗生素的種類、濃度和處理時(shí)間也不同,因此必須對(duì)不同植物采用不同的抗生素的種類、濃度和處理時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探討。一般情況下,為消除革藍(lán)氏陽(yáng)性菌對(duì)有些木本植物污染莖段組培苗,可在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素、頭孢等混合物,可使細(xì)菌完全被消除。另外用頭孢菌素Ⅱ消除某些觀賞植物外植體中的內(nèi)生菌也有非常明顯的效果。  �。├貌《驹谥仓牦w內(nèi)分布不均勻的原理,生產(chǎn)脫毒苗   主要是針對(duì)在植物內(nèi)部寄生的病毒,因病毒在生長(zhǎng)點(diǎn)區(qū)域幾乎不存在,且病毒也難以長(zhǎng)到頂芽的分生組織,所以切取頂芽的分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng),通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)就可培養(yǎng)成無(wú)病毒植株,而且脫毒效果好,后代遺傳性穩(wěn)定,所以是目前生產(chǎn)無(wú)病毒苗較安全、較重要的一條途徑。   (七)利用培養(yǎng)基中高鹽或高糖的濃度,抑制微生物的生長(zhǎng)   在培養(yǎng)基中有一些高鹽或高糖的濃度可抑制微生物生長(zhǎng),或單寧酸存在時(shí)也可以達(dá)到抑制微生物生長(zhǎng)的效果。  �。ò耍p少培養(yǎng)基中的某些有機(jī)成分,可抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖   培養(yǎng)基中有機(jī)物如VB1、VB6、煙酸等有機(jī)成分,是某些細(xì)菌生長(zhǎng)的必需物質(zhì),除去這些有機(jī)物后,細(xì)菌無(wú)法生長(zhǎng)發(fā)育,逐漸死亡減少。這樣也可在一定程度上減輕污染所帶來(lái)的危害。   總之,組培生產(chǎn)中污染的發(fā)生是不可忽視的環(huán)節(jié),在生產(chǎn)過(guò)程中思想上要高度重視,行動(dòng)上要有嚴(yán)格遵守操作規(guī)范,才能在一定程度上減輕污染所帶來(lái)的危害。 [詳情]

  • 香菇采收后的加工發(fā)布時(shí)間:2011-08-17

    ◆此條信息真實(shí)性未經(jīng)本網(wǎng)站證實(shí),請(qǐng)謹(jǐn)慎采用,風(fēng)險(xiǎn)自負(fù)! 香菇采收后,必須及時(shí)組織加工,力爭(zhēng)當(dāng)天摘,當(dāng)天加工干燥,以免引起發(fā)黑變質(zhì)和腐爛。加工干燥的方法:�。�1)日曬干燥。香菇干燥以日曬較方便易行,且曬干的菇維生素D的含量較高。方法是:把采回的香菇及時(shí)攤放在當(dāng)陽(yáng)的曬谷場(chǎng)或水泥地面上。曬時(shí),先將菇蓋向上,菇柄朝下,一個(gè)個(gè)擺開(kāi),曬至半干后,菇柄向上,菇蓋朝下,直至九成干以上。如遇陰雨天,要補(bǔ)用火力烘干。�。�2)烘烤干燥。①先將得菇按大、中、小分三類,分別裝入烘盤。放菇時(shí),菇蓋朝上,菇柄朝下,依次排列,不要零亂堆疊。烘烤時(shí)大菇盤裝在較上層,小菇盤裝在較下層。②燒火時(shí),火力要先小后大,不可一下太猛。開(kāi)始燒至30℃,以后每隔3小時(shí)至4小時(shí),升溫5℃,較后維持在60℃,以免把菇烤熟焦。也不要低于55℃以免時(shí)間延長(zhǎng),導(dǎo)致香菇變黑變質(zhì)。③香菇烘烤至八成干時(shí),便移出烤房,放到干燥的地方經(jīng)12個(gè)小時(shí)后,再?gòu)?fù)烤3小時(shí)到4小時(shí),媽可達(dá)到干燥要求。這樣烤的香菇干燥一致,不易破碎,質(zhì)量好�?疽淮涡�12-18小時(shí)。④烘烤用柴火、煤火、木炭都可以,但烤房?jī)?nèi)一定要無(wú)煙,無(wú)火苗�!×硗�,應(yīng)注意:(1)采收、加工和貯藏時(shí),較好分級(jí)進(jìn)行,以利于按質(zhì)論價(jià),優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià),提高經(jīng)濟(jì)效益。(2)香菇干燥后,較好用雙重塑料袋盛裝,裝時(shí)宜趁干燥時(shí)的余溫及時(shí)裝入,并做到密閉貯茂。(3)貯藏香菇,較好放在干燥的樓上,切忌放在濕處或地下室倉(cāng)庫(kù)內(nèi)。堆疊不要太高太重,以免壓破壓碎菇體。(4)包裝后貯藏期間要經(jīng)常檢查,若水分超過(guò)13%,應(yīng)立即得復(fù)培。如發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)害,可用硫進(jìn)行密閉薰蒸消毒治蟲(chóng)。 (記者 不詳) [詳情]

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