常夏石竹是多年生宿根草本植物,節(jié)膨大,單葉對生,株高l0-15cm,四季常綠,三季開花。適應(yīng)性廣,抗嚴(yán)寒(可抗零下35℃的低溫),耐干旱瘠薄(每月只需澆1次水,很少施肥),花很美(盛開期花朵可覆蓋地面),對土壤酸堿度要求也不十分嚴(yán)格(pH值介于5-8之間的土壤均可種植) ,分生、分化能力強(qiáng),繁殖容易,生長迅速。
常夏石竹的根系龐大,可防止土壤沖刷和水土流失,并能抗有害氣體和病蟲害,有重要的衛(wèi)生環(huán)保功能�?勺鳛閳@林的重要組成部分,也可栽培于庭院內(nèi)外、公路兩旁、風(fēng)景觀光地帶,以及露天活動和休息場地,不僅具有較好的美化、綠化作用,還具有較強(qiáng)的觀賞性。
目前常見的草坪多是細(xì)葉苔草、狗牙根、地毯草等。春、夏、秋三季鮮綠,冬季枯黃,不開花,缺乏耐寒性、抗逆性、美觀性和持久性。如結(jié)合本地資源特點及市場優(yōu)勢,引種常夏石竹,形成規(guī)�;a(chǎn),逐步更新現(xiàn)有劣質(zhì)草坪,可產(chǎn)生較大的社會效益,同時,按現(xiàn)在的市場價格1.10元/棵,每平方米需草苗10-11棵計算,每畝將獲得6000-7000 元的經(jīng)濟(jì)收入,其經(jīng)濟(jì)效益可觀。
目前,常夏石竹的繁殖方法主要是分株和分蘗,但難以快速大量繁殖種苗,這也是當(dāng)前常夏石竹種苗較貴的重要原因之一。本文介紹一種對常夏石竹頂芽和腋芽進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖試管苗的方法,利用這項技術(shù),可在短期內(nèi)繁殖上百萬株的種苗,具有成本低、效益高的特點。
一、配制培養(yǎng)基
根據(jù)不同需要,嚴(yán)格精確地稱取各種化學(xué)試劑,配成不同類型的培養(yǎng)基。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2mg/L6-BA;分化培養(yǎng)基為MS+lmg/L6-BA+0.1mg/LNAA;生根培養(yǎng)基為 MS+0.1mg/LIAA+0.Img/LIBA。高壓滅菌條件為120℃,1.1-1.2個大氣壓,20 分鐘。
二、培養(yǎng)方法
1.愈傷組織培養(yǎng)。將常夏石竹幼枝在清水中洗凈,剪去葉片和大部分莖段,取莖尖和腋芽部分,再沖洗1-2次,淋干。在超凈工作臺上,先用75%的乙醇浸泡莖尖30-60秒,再用0.1%hgcl2浸10分鐘,較后用無菌水沖洗數(shù)次。用鑷子和解剖刀取出包括生長點的組織切塊,接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件為:每天光照10-12小時,光照度為1000-2000Lx,溫度為25℃左右。大約15-25d后,接種的外植體就可以膨大,形成愈傷組織,1周后,可將愈傷組織進(jìn)行繼代培養(yǎng)或分化培養(yǎng)。
2.繼代培養(yǎng)。將愈傷組織在無菌條件下,從試管或培養(yǎng)瓶中取出,用鑷子和解剖刀剔除附著在愈傷塊上的培養(yǎng)基,并用無菌水反復(fù)清洗數(shù)次,直至愈傷塊上無殘留培養(yǎng)基為止。用解剖刀將愈傷塊切成數(shù)個小塊,再接種到裝有愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,在與誘導(dǎo)愈傷組織相同的培養(yǎng)條件下繼續(xù)培養(yǎng)。幾天后,培養(yǎng)瓶中的小愈傷塊即可逐漸長大,這一過程可反復(fù)操作。通過愈傷組織的繼代培養(yǎng),原來接種的一個莖尖組織可繁殖出大量的新枝,用于分化培養(yǎng)。
3.分化培養(yǎng)。將愈傷組織在無菌條件下,從試管或培養(yǎng)瓶中取出,用無菌水洗凈,切成小接種塊,接種到裝有分化培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,分化培養(yǎng)的條件同愈傷組織培養(yǎng)。大約1個月以后,愈傷組織就可分化出芽,并繼續(xù)長出新枝。當(dāng)分化出的新枝長到1-2cm或分化出一定數(shù)量后,將這些小幼苗在無菌條件下取出,進(jìn)行生根培養(yǎng)或重新誘導(dǎo)分化。
4.生根培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)瓶中的幼苗長到2cm左右時,將幼苗在無菌條件下取出,放人裝有生根培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)條件同分化培養(yǎng)。大約半個月后,幼苗即可生根。
5.煉苗。當(dāng)幼苗的根長到一定程度,幼苗形體已顯健壯時,將幼苗取出,在清水中洗凈附著在根上的培養(yǎng)基(注意:一定要嚴(yán)格洗凈,否則會爛根)。將洗凈的幼苗排好,用清水噴濕,在溫度15℃-25℃、濕度60%-80%的條件下煉苗12-24小時。
6.移栽。煉苗后,將幼苗移栽入由蛭石組成的馴化苗圃中馴化,每天定期給幼苗噴施馴化培養(yǎng)液和清水,大約15-20d后,視幼苗長勢,即可移栽到苗圃中。
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