將采用物理、化學(xué)或藥物的手段將微生物全部殺死,大家都知道在食用菌栽培材料及空氣、水和用具上到處都有微生物存在。當(dāng)培養(yǎng)一種真菌時,培養(yǎng)基、器皿或用具必須經(jīng)過滅菌后才能使用,否則會使培養(yǎng)物被其他真菌或微生物侵染而影響實際栽培。滅菌的方法很多,較常用的方法有以下幾種。
1、干熱滅菌。
由于一般玻璃用具,培養(yǎng)皿、吸管等將滅菌材料。用報紙包好后,放入烘箱中。使溫度逐漸升至150—160℃保持2小時后,關(guān)閉電源。使緩慢冷卻。(降溫太快時玻璃易碎)即滅菌完畢。
2、濕熱滅菌。
濕熱滅菌就是利用蒸汽殺菌。它不需要像干熱滅菌時那樣高的溫度,因為加熱殺菌是使微生物的蛋白質(zhì)凝固。而蛋白質(zhì)凝固時與含水量、溫度等有關(guān),含水量大時使其凝固所需要的溫度低,反之、含水量小使其凝固時所需要的溫度高,溫?zé)釡缇址殖汉透邏簝煞N。
①、常壓法
常壓滅菌是用蒸汽鍋(或普通鍋)蒸的方法。溫度達(dá)到100℃起一般需要4—6小時,溫度不超過100℃時,根據(jù)滅菌量的多少,一般保持在8—24小時。即可達(dá)到無菌效果。在沒在高壓滅菌設(shè)備或在高溫滅菌易破壞的培養(yǎng)基情況下多采用此法。另常壓滅菌還有間歇滅菌法。此法比較麻煩,通常必須進(jìn)行三次。每次一小時,因為較好次蒸后,其中營養(yǎng)細(xì)胞被殺死,而其芽胞還保持著活力,所以蒸后,將培養(yǎng)基放入溫箱中24小時,待其芽胞萌發(fā)后,再蒸第二樣再經(jīng)24小時,蒸第三次,這樣才能滅菌徹底。
②、高壓法
此法乃是利用高壓蒸汽殺菌鍋進(jìn)行滅菌,當(dāng)用蒸汽滅菌時,如鍋內(nèi)增加壓力,則溫度亦隨之增高,例如壓力0.56公斤/厘米2=0.55帕斯卡。溫度為112.6℃;如壓力1公斤/厘米2=0.98帕斯卡。溫度可達(dá)120—121℃。通常理想滅菌干120℃,20分鐘能達(dá)到目地。115℃、30分鐘也就可以了。使用高壓殺菌鍋時要分別注意兩點。1、增壓前必須把鍋內(nèi)冷空氣排盡,否則壓力雖然升高,而其溫度達(dá)不到要求。2、滅菌完畢后,應(yīng)使鍋內(nèi)壓力徐徐下降,不然,容皿中液體會噴出。棉塞也易脫落,致使前功盡棄,在無烘箱時,其它器皿也可用溫?zé)釡缇�,滅菌前�?yīng)該用紙包好。
3、火焰滅菌。
對于接種針或其它金屬用具的滅菌,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱,此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采取通過火焰而達(dá)到滅菌的目地。
4、藥物滅菌。
所用藥品種類其多,只例三種
①、70%酒精,用于冷卻燒紅后的接種針,操作前手或用具的表面殺菌,載玻片,蓋玻片的浸泡等。
②、新潔爾滅、市售一般為5%溶液,用時稀釋至萬分之一到千分之一,用于工作環(huán)境和器皿表面的滅菌。
③、0.1%升汞液:用于材料表面的殺菌,用具或廢棄的培養(yǎng)物實驗后的處理。
④、福爾馬林(40%由醛溶液):用于空間的熏蒸滅菌,加熱或加高錳酸鉀使放盡甲醛氣體,注意將空間密閉并維持24小時
5、紫外線滅菌,用于接種室等的空氣滅菌。
(記者 佚名)